评《动物细胞的培养：基本技术手册》

食品与生物工程学院：朱明军

由R.IAN FRESHNEY 编著的《Culture of Animal Cells:A Manual of Basic Technique》第三版于1994年由美国著名的John Wiley & Son 公司出版。由于该书是一本基本技术手册，所以内容比较全面，实用。全书主要内容由二十三个部分组成，另外还有几个附录，现对主要内容介绍如下：

1.前言：简单介绍了组织培养的优点和缺陷；

2.培养细胞的生物学：简单介绍了培养环境，细胞粘附，连续细胞系的开发、减少分化等内容；

3.实验室的设计和布局：全面介绍了实验室从设计、建造到布局的内容，重点介绍了无菌操作区、接种和保藏等方面的内容；

4.装备实验室：全面介绍了动物细胞培养实验室的必需设备、辅助设备以及一些附加的有用设备，同时介绍了一些易耗设备；

5.无菌技术：介绍了无菌技术的目的、选址，工作台，个人卫生要求，移液管的处理，无菌操作，层流等，最后总结了无菌操作的标准程序；

6.实验室安全和生物危险性：介绍了实验室的安全常识，防火和防辐射以及生物危险性以处理等；

7.培养环境：支持物，通气，培养基和温度。介绍了动物细胞培养中的支持物、气相、培养基成分、培养基及血清的选择、培养基物理特性以及接种温度等基本内容；

8.准备和灭菌：介绍了实验前应准备的一些仪器和设备，试剂和培养基等，灭菌方法也穿插在其中讲解；

9.组织分离和基本培养：介绍了组织分离和基本培养方面的内容；

10.维持培养：细胞系。介绍了维持培养各方面的内容，如更换培养基，次代培养中的细胞浓度和密度，以及细胞生长慢的原因等；

11.特种细胞的克隆和挑选：介绍了克隆技术，选择性培养基以及细胞与支持物的相负作用；

12.细胞分离的物理方法：介绍了细胞大小和沉降速率、细胞密度和等容沉淀、荧光激活细胞分离以及其它的一些细胞分离技术；

13.特性：介绍了细胞形态学、染色体（染色体制备、分析、着色等）、DNA（DNA杂交、DNA指纹技术等）、RNA和蛋白质、酶活性、抗原标记和分化等方面的内容；

14.分化的诱导：介绍了繁殖与分化、分化的标记、分化的诱导（诱导剂、细胞相互作用、细胞与载体相互作用）、分化与恶性肿瘤以及实用性等；

15.转化型：介绍了什么是转化、悬浮克隆、生长的接触抑制和密度限制、遗传畸变、细胞产品和对血清的依赖、侵染力和肿瘤的产生等；

16.污染：介绍了微生物污染的种类、微生物污染的检测、交叉污染以及在防止污染方面的注意事项等；

17.不稳定性、变异和保存：介绍了转化和衰老、遗传的不稳定性、细胞系的选择、培养基和血清的标准化、细胞冷冻、细胞库的建立等方面的内容；

18.计量和实验设计：介绍了细胞系的选择、实验的设计、细胞计数、细胞重量、DNA、蛋白质的沉淀、酶分析和免疫分析样品的准备、生长周期、血细胞计数器等；

19.活性和细胞毒性的测定：阐述了离体培养方法的有限性、分析的性质、抗癌药物的筛选、突变性、致癌性以及炎症；

20.特种细胞的培养：介绍了几种特种细胞培养的具体细节，如上皮细胞、间质细胞、神经外胚层细胞、造血细胞等；

21.肿瘤细胞的培养：介绍了肿瘤组织的培养，从取样、分离、基本培养、特性描述、细胞系的开发到选择性培养；

22.三维培养体系：介绍了组织类培养、器官培养以及“滤井”在裴培养中的应用；

23.专业技术：介绍了大规模培养技术（悬浮培养、单层培养）、射线显迹法、冷血动物细胞的培养、细胞同步性、共焦显微法、体细胞融合、转基因、单克隆抗体的生产、原位分子杂交等专门技术。

从以上对该书内容的简介可以看出该书内容全面，取材丰富，涵盖范围广，同时把重点放在际操作上，综观全书，有以下几个特点：

1.实用性强

该书是一本基本技术手册，所以作者侧重于向读者介绍一些有用的基本实验技术和方法。正如作者在前言中所说虽然细胞培养技术有了很大的发展，但是基本操作技术基本上没有多大变化，所以作者在第三版中仍然保留了一、二版中的一些基本的实用的实验技术和方法。该书的实用性还体现在

作者在介绍一些内容时充分考虑其适用性，例如在实验室装备一节中，虽然现代科学技术的发展为动物细胞培养提供了一系列先进的仪器和设备，但这些设备往往价格昂贵，而且运行费用也高，所以作者在推荐实验室装备时尽量以一些价格适宜，运行费用低，适用的设备它们，这对于经费不足的实验室有特别重要的意义。

2.内容广泛，堪称动物细胞培养领域的“圣经”

从以上对该书内容的简介中可以看出，该书内容非常广泛，从实验室的设计、灭菌等基本知识到非常专业的单克隆抗体的生产等，从玻璃器皿的配置到大型设备的购买等。可以毫不夸张地说，即使是初学者也可以很快熟悉动物细胞培养领域的主要内容，对于经验丰富者，该书同样值得一看，因为书中也介绍了一些很专业的动物细胞培养方面的知识，如第三版中新添加的细胞培养中分子技术的应

用（荧光标记原位杂交，DNA指纹技术，染色体着色等）。正因为该书内容广泛、实用，有人将它比作动物细胞培养领域的“圣经”。

3.内容的组织层次分明，概念清晰，图文并茂易懂，便于自学

该书的内容组织层次分明，图文并茂易懂。全书共分二十三个部分，每个部分里面又有若干个小标题，使得读者能很快了解各部分的主要内容，这种结构形式使得即使是初学者也能很快看懂，以无菌技术一节为例，作者从无菌技术的目的入手，详细介绍了无菌操作地点的选择，工作台的介绍，个人卫生，个人卫生，移液管，无菌处理，层流和标准操作等，即使是对这节内容不熟悉的初学者，也可以很快掌握无菌操作技术，并按标准操作程序进行实验。

与一、二版相比，作者在第三版中添加了一些新的内容：1.细胞培养中分子技术的应用，如荧光标记原位杂交技术，DNA指纹技术，染色体着色技术等；2.细胞培养中细胞间的相互作用；3.分离细胞的新方法；4.评价细胞的毒性、活性和突变性的新方法；5.特种细胞培养的实验细节；6.新的或改进的观察细胞的新方法。同时作者在第三版中提供了350多种参考书目，国际性细胞库目录，试剂及销售商家的目录，主题词索引等，这更增加了该书的实用性。

该书更新和大大拓展了前人的研究范围，被认为是动物细胞培养领域的“圣经”，对初学者及经验丰富者从事组织及细胞培养均有指导意义。该书可以作为相关专业高年级大学生及研究生的教学参考书，同时对于从事细胞生物学、细胞学、分子生物学、免疫学、神经科学、毒理学和癌症生物学及相关领域的研究者来说也是一本不可多得的参考书。

本书馆藏索书号：Q954.6-33 6-4